Notes

Isoenzima-de-lactato-deshidrogenasa
Los patrones de isoenzimas LDH del líquido del quiste muestran LDH 4 y 5 > > LDH 1 y 2

De: Patología Diagnóstica: Cabeza y Cuello (Segunda Edición), Términos relacionados:

Marcadores cardíacos

Amitava Dasgupta PhD, DABCC, Amer Wahed MD, en Clinical Chemistry, Immunology and Laboratory Quality Control, las isoenzimas de lactato deshidrogenasa (LDH) se utilizaron ampliamente en el pasado para el diagnóstico de infarto de miocardio, pero más recientemente, debido a la disponibilidad de inmunoensayos de troponina, lactato El ensayo de isoenzima deshidrogenasa se ha interrumpido principalmente en el entorno clínico para el diagnóstico de infarto de miocardio. Sin embargo, puede usarse para evaluar ciertos trastornos hepáticos. Brevemente, la LDH existe en cinco formas de isoenzimas:

LDH-1: Presente principalmente en miocitos cardíacos y eritrocitos.

LDH-2: Presente principalmente en los glóbulos blancos.

LDH-3: Presente en mayor cantidad en el tejido pulmonar.

LDH-4: Las cantidades más altas se encuentran en el páncreas, los riñones y la placenta.

LDH-5: Las cantidades más altas se encuentran en el hígado y el músculo esquelético.

Por lo general, los niveles de isoenzima LDH aumentan 24 a 72 horas después del infarto de miocardio y alcanzan una concentración máxima en 3 a 4 días. Los niveles permanecen elevados durante 8 a 14 días, lo que lo convierte en un marcador tardío de infarto de miocardio. Normalmente, la concentración de LDH-1 es más baja que la de LDH-2, pero después de un infarto de miocardio, la concentración de LDH-1 se eleva y supera la concentración de LDH-2. Este fenómeno se denomina patrón LDH invertido. Sin embargo, la hemólisis (la LDH está presente en los eritrocitos en una concentración similar) produce este cambio característico y es importante asegurarse de que la muestra no esté hemolizada antes del análisis. Además, la LDH es un marcador no específico de infarto de miocardio y su concentración puede estar elevada en anemia hemolítica, accidente cerebrovascular, pancreatitis, miocardiopatía isquémica y una variedad de otras enfermedades.

La glucógeno fosforilasa es una enzima esencial en la regulación del metabolismo del glucógeno, donde esta enzima convierte el glucógeno en glucosa 1-fosfato en el primer paso de la glucogenólisis. Se han identificado tres isoenzimas diferentes en humanos: glucógeno fosforilasa BB (cerebro), glucógeno fosforilasa LL (hígado) y glucógeno fosforilasa MM (músculo). Los músculos esqueléticos contienen únicamente glucógeno fosforilasa MM, mientras que la glucógeno fosforilasa BB se encuentra principalmente en altas concentraciones tanto en el músculo cardíaco como en el cerebro. La glucógeno fosforilasa BB se libera a la circulación 2-4 h después del inicio de la isquemia cardíaca y vuelve a los niveles basales 1-2 días después del infarto agudo de miocardio, lo que la convierte en un marcador temprano.

La albúmina modificada por isquemia también es un biomarcador cardíaco relativamente nuevo capaz de detectar isquemia miocárdica en cuestión de minutos. Este biomarcador continúa aumentando durante 6 a 12 horas después del infarto agudo de miocardio y luego regresa al valor inicial. La isquemia miocárdica da como resultado una reducción de la capacidad de la albúmina circulante para unirse al cobalto. El nivel de albúmina modificada por isquemia en el suero se mide por su capacidad reducida de unión al cobalto. Se ha desarrollado y comercializado un ensayo rápido con un tiempo de respuesta de laboratorio de 30 minutos como el primer marcador de isquemia miocárdica aprobado por la Administración de Drogas y Alimentos de los EE. UU. (FDA) comercialmente disponible. Sin embargo, los niveles de albúmina modificada por isquemia también están elevados en pacientes con cirrosis, ciertas infecciones y cáncer avanzado. Estos factores reducen la especificidad del ensayo.

La proteína A plasmática asociada al embarazo es una enzima metaloproteinasa, y después de un infarto agudo de miocardio su valor aumenta entre 2 y 30 h. Sin embargo, actualmente se está investigando su utilidad como biomarcador cardíaco. Sin embargo, se dispone de un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) para su medición. Otro biomarcador cardíaco potencial es el complejo de proteína 8/14 relacionado con mieloide, que está involucrado en la desestabilización de la placa. Es probable que su nivel aumente después de una lesión miocárdica aguda [17]. La proteína de unión a ácidos grasos de tipo cardíaco es una proteína citosólica de 15 kDa presente en una concentración muy alta en el tejido miocárdico, pero está presente en concentraciones más bajas en el músculo esquelético, el riñón y el cerebro. Por lo tanto, la proteína de unión a ácidos grasos de tipo cardíaco es un nuevo biomarcador cardíaco potencial. La concentración de la proteína transportadora de ácidos grasos de tipo cardíaco aumenta después del infarto agudo de miocardio, pero también se elimina rápidamente de la circulación debido al bajo peso molecular. Los ácidos grasos libres también aumentan en el plasma después de un infarto de miocardio, pero no se ha establecido su papel en el diagnóstico del infarto agudo de miocardio.

ADN (

Toxicología hepática

GLPlaa, en Comprehensive Toxicology, Cornish y colaboradores (Cornish et al. 1970; Grice et al. 1971) demostraron que las isoenzimas LDH podrían usarse para diferenciar la lesión hepática de la renal en ratas. El daño hepático (tetracloruro de carbono, tioacetamida o dietanolamina) afectó la LDH-5 sérica, mientras que la LDH-1 y la LDH-2 se elevaron después de la lesión renal aguda causada por el cloruro mercúrico. Sin embargo, la evaluación histopatológica mostró que el daño morfológico generalmente estaba presente en dosis inferiores a las que producen alteraciones séricas detectables, lo que indica que las actividades de las enzimas séricas no sustituyen el examen de tejidos mediante microscopía óptica.

Genética del conejo y modelos transgénicos

Neil D. Christensen, Xuwen Peng, en The Laboratory Rabbit, Guinea Pig, Hamster, and Other Rodents, los conejos GS son una colonia cerrada derivada de los conejos NZW. Se encontró que estos conejos eran altamente respondedores de anticuerpos a la isoenzima deshidrogenasa láctica LDH-H4 y, por lo tanto, difieren de la mayoría de los conejos blancos de Nueva Zelanda (NZW) que no producen anticuerpos detectables contra este antígeno (Falkenberg y Frensdorff, 1975; Freyler et al., 1976). ). Se concluyó que en conejos GS la respuesta de anticuerpos al antígeno LDH-H4 está controlada por un gen Ir y que estos animales podrían ser un modelo útil para estudiar el control genético de la respuesta inmune en conejos (Falkenberg y Frensdorff, 1975).

Práctica de Patología Toxicológica

Graham S. Smith,... Robin M. Walker, en Haschek y Rousseaux's Handbook of Toxicologic Pathology (tercera edición), la lactato deshidrogenasa (LDH) es citoplasmática y las isoenzimas son tetrámeros del corazón (H) o de las subunidades musculares (M). Todos los tejidos contienen diversas cantidades de las 5 isoenzimas LDH; sin embargo, el músculo, el hígado y los glóbulos rojos (hemólisis) son las principales fuentes de actividad de la LDH sérica. Las isoenzimas se pueden separar por electroforesis. La isoenzima hepática es un indicador de hepatotoxicidad menos sensible que las aminotransferasas. Se informa que la vida media de LDH es de menos de 6 horas en perros. Debido a su falta de especificidad, la LDH rara vez se incluye en los estudios de seguridad no clínicos y tiene poco mérito en la determinación de la isoenzima LDH. Existen diferencias entre especies en la fuente tisular predominante de las actividades séricas de CK y LDH.

Hiperlactatemia y acidosis láctica

Hernando Gómez, Barry A. Mizock, en Critical Care Nephrology (Tercera edición), La existencia de una L-lactato deshidrogenasa mitocondrial (mL-LDH) se sugirió ya en 1951. Posteriormente, Brooks et al. utilizaron electroforesis en gel de agarosa para medir fracciones de isoenzimas LDH en miocitos cardíacos y esqueléticos y en hepatocitos34, lo que sugiere la existencia de LDH mitocondrial en la matriz y la membrana mitocondrial interna (IMM) y confirma hallazgos previos de otros grupos. 32 Hashimoto et al. además proporcionó datos convincentes que sugieren que IMM LDH es parte de un complejo de oxidación de lactato mitocondrial (mLOC). Usando microscopía de escaneo láser confocal, transferencia Western e inmunoprecipitación, estos autores demostraron la co-localización de mLDH con MCT1, CD147 (una proteína transmembrana de un solo segmento que se cree que ancla MCT1) y citocromo oxidasa (COX, el motivo aceptor de oxígeno de la cadena de transporte de electrones) en miocitos L6 de rata, y propusieron la asociación de estos componentes como evidencia de la existencia de un complejo de oxidación de lactato mitocondrial36. Hashimoto et al. han demostrado que el anión lactato induce la liberación de especies reactivas de oxígeno (ROS) de los miocitos y la regulación positiva de genes (ARNm y expresión de proteínas) que codifican MCT1 a la hora y COX a las seis horas. 37 Además, estos autores demostraron que la expresión de COX se correlacionó con un aumento en la expresión del coactivador 1α del receptor activado del proliferador de peroxisomas γ (PGC1α) y la unión al ADN del factor respiratorio nuclear 2 (NFR-2), ambos involucrados en biogénesis mitocondrial, un proceso coordinado entre el núcleo y las mitocondrias para regenerar mitocondrias funcionales,38 lo que sugiere un papel importante adicional para el lactato como molécula de señalización.

Evaluación de laboratorio de la anemia

Sirisha Kundrapu, Jaime Noguez, en Advances in Clinical Chemistry, La lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima de transferencia de hidrógeno que cataliza la conversión reversible de lactato a piruvato. La enzima es un tetrámero compuesto por dos tipos diferentes de subunidades. Las diferentes combinaciones de subunidades dan como resultado cinco isoenzimas LDH estructuralmente diferentes que están presentes en todas las células del cuerpo. Diferentes tejidos tienen diferente composición de isoenzimas. La isoenzima LDH-1 se encuentra predominantemente en el músculo cardíaco, la LDH-2 se encuentra principalmente en el sistema reticuloendotelial, la LDH-3 predomina en los pulmones, la LDH-4 en los riñones y la LDH-5 en el hígado y el músculo esquelético. Las concentraciones de enzima LDH en los diversos tejidos son aproximadamente 500 veces mayores que las que se encuentran normalmente en el suero, por lo que la fuga incluso de una pequeña masa de tejido dañado puede conducir a un aumento significativo en la actividad de LDH sérica observada. Debido a su amplia distribución en todos los tejidos del cuerpo, las elevaciones de la LDH sérica ocurren en una variedad de condiciones que incluyen infarto de miocardio, hemólisis y enfermedad hepática. Entonces, aunque puede ser un marcador sensible de daño celular, no es específico. Las isoenzimas LDH 1 y 2 son más específicas para la destrucción de glóbulos rojos, pero estas enzimas también aumentan en pacientes con infarto de miocardio, por lo que las elevaciones no son lo suficientemente específicas para usarse para el diagnóstico de anemia hemolítica.

Se han desarrollado numerosos métodos de prueba enzimáticos para la determinación de la LDH total basados en reacciones directas o inversas catalizadas por la LDH. La reacción directa es la oxidación de lactato a piruvato a pH 8,8-9,8 y la reacción inversa es la reducción de piruvato a lactato a pH 7,4-7,9. En los métodos espectrofotométricos, la actividad de la enzima LDH se determina midiendo la tasa de oxidación de la reacción directa y la tasa de reducción de la reacción inversa como la absorbancia a 340 nm. Se ha recomendado que los métodos que emplean la reacción directa proporcionan una mayor estabilidad de los reactivos y una relación más lineal entre la actividad enzimática y la cantidad de suero analizado en un rango más amplio de actividad en muestras de pacientes [49,50]. Además, la reacción directa es más rápida porque no requiere un paso de preincubación para agotar los α-cetoácidos endógenos. También se han desarrollado varios métodos colorimétricos para la determinación de los niveles de LDH total en suero basados en reacciones enzimáticas acopladas en las que el lactato o el piruvato reaccionan con otros compuestos en una reacción indicadora terminal formando un producto colorido que se puede medir colorimétricamente.

La medición de isoenzimas LDH individuales se logra de manera más confiable mediante electroforesis, aunque estos métodos ya no se usan comúnmente. Se han desarrollado técnicas de inmunoinhibición y métodos de anticuerpos monoclonales para medir LDH-1 y LDH-2 específicamente sin separar las otras isoenzimas. Aunque la principal ventaja de estos métodos sobre la electroforesis es que pueden automatizarse fácilmente y son más adaptables a los sistemas de alto rendimiento, no lograron una aceptación comercial. Las mediciones de LDH total siguen siendo los métodos más utilizados en la práctica clínica y están disponibles en la mayoría de los laboratorios clínicos.

Diagnóstico y tratamiento de la malaria

Kathrine R. Tan, Paul M. Arguin, en The Travel and Tropical Medicine Manual (quinta edición), los ensayos de tiras inmunocromatográficas detectan antígenos palúdicos en muestras de sangre por punción digital utilizando tiras reactivas o tarjetas impregnadas con anticuerpos específicos. Estos se basan en la detección de proteína 2 rica en histidina (HRP-2) de P. falciparum o isoenzimas de lactato deshidrogenasa del parásito o aldolasa. A diferencia de la microscopía, que requiere un microscopio y un técnico capacitado, las RDT se pueden usar en lugares sin un microscopista calificado. Solo la prueba de malaria BinaxNOW® está aprobada por la Administración de Drogas y Alimentos de los EE. UU. (FDA) para su uso en los Estados Unidos. Las desventajas incluyen el costo de los kits de prueba, la incapacidad para determinar las especies de malaria y la carga parasitaria, y la posible falta de sensibilidad a parasitemias muy bajas. Por lo tanto, el uso de RDT debe reservarse para situaciones en las que no se dispone de inmediato de microscopía de calidad y debe seguirse lo antes posible con microscopía para confirmar los resultados, determinar la especie y calcular la parasitemia. Además, HRP-2 puede persistir en la sangre durante varias semanas después de que se haya tratado una infección, por lo que no se recomienda el uso de esta prueba para diagnosticar paludismo en un paciente sintomático que ya ha recibido un ciclo de tratamiento con antipalúdicos. Sin embargo, si se necesita un diagnóstico retrospectivo en un paciente asintomático que se trató a sí mismo con antipalúdicos, la positividad persistente de la prueba PfHRP-2 es útil.

Músculo esquelético

Ramesh C. Gupta,... Jitendra K. Malik, en Handbook of Toxicology of Chemical Warfare Agents (Segunda edición), LDH cataliza la síntesis de lactato y piruvato en una reacción reversible y se usa comúnmente como biomarcador de daño o muerte celular. La distribución normal de LDH y sus isoenzimas en los músculos esqueléticos de ratas reveló que en los controles, se encontró que la actividad de LDH era más alta en EDL, seguida por el diafragma, y más baja en SOL (Tabla 40.8). En comparación con los músculos, la actividad enzimática fue escasa en el suero. Curiosamente, los tres músculos y el suero contenían las cinco isoenzimas LDH electroforéticamente distintas, aunque en cantidades variables. Cada músculo presentó un patrón característico de isoenzimas LDH. Por ejemplo, EDL contenía una gran proporción de LDH-5 (62,6 % de la actividad total) y muy poca LDH-1 (3,5 %). SOL, por otro lado, tenía una cantidad muy pequeña de LDH-5 (11,3 %) y alrededor del 20 % de cada una de las otras cuatro isoenzimas (LDH-1-LDH-4). En general, los valores de isoenzimas LDH en diafragma fueron intermedios a los de EDL y sóleo. El diafragma tenía predominantemente LDH-5 y LDH-4 (40% y 27,7%, respectivamente). En el suero de control, la isoenzima LDH-5 fue el 87 % de la actividad LDH total (100 %).

Cuadro 40.8. Distribución normal de LDH e isoenzimas LDH en músculos esqueléticos y suero de ratas

Los valores expresados en términos de UI/L se presentan como medias ± SEM (n=4-6); los números entre paréntesis son porcentajes de isoenzimas a la actividad total de LDH (100%).

La actividad de LDH total aumentó significativamente en EDL, diafragma y suero con carbofurano (1,5 mg/kg, sc) o metilparatión [5 mg/kg, administrados por vía intraperitoneal (ip)] dentro de 1 h de la inyección. Cada inhibidor de AChE causó una marcada elevación de las cinco isoenzimas en el suero, con aumentos máximos en LDH-1 y LDH-4 (tres veces). A diferencia del suero, las isoenzimas de LDH del músculo mostraron patrones variables por intoxicación con carbofurano o metilparatión. Una disminución significativa de ATP parece ser el mecanismo implicado en la fuga de enzimas citoplasmáticas/mitocondriales a la circulación (Gupta et al., 1994). Para obtener más detalles sobre los biomarcadores de toxicidad muscular, consulte Gupta et al. (2014).

Bioquímica Clínica y Hematología

Ida M. Washington, Gerald Van Hoosier, en The Laboratory Rabbit, Guinea Pig, Hamster, and Other Rodents, la lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima que cataliza la conversión de piruvato en lactato, junto con NADH en NAD+, durante la glucólisis en condiciones de hipoxia. La enzima LDH está presente en todas las células, pero se concentra en músculo, hígado y riñón. La LDH existe como cinco isoenzimas, LDH-1 a LDH-5, cada una compuesta por cuatro subunidades. Los niveles diferenciales de isoenzima LDH se utilizan para el diagnóstico (Markert et al., 1975). La isozima LDH-1 (4H) tiene cuatro subunidades cardíacas y es la principal isozima del corazón. La isozima LDH-2 (3H1M) tiene tres subunidades cardíacas y una muscular y es la principal isozima en el sistema de macrófagos-monocitos y suero. La isozima LDH-3 (2H2M) tiene dos subunidades cardíacas y dos musculares y es la isozima principal en los pulmones. La isozima LDH-4 (1H3M) tiene una subunidad cardíaca y tres musculares y es la isozima principal en los riñones. La isozima LDH-5 (4M) tiene cuatro subunidades musculares y es la principal isozima en el hígado y el músculo esquelético. La concentración de LDH está elevada en suero como resultado del infarto de órganos y muerte celular significativa que resulta en pérdida de citoplasma. Por ejemplo, las elevaciones de LDH resultan de condiciones tales como hepatitis, shock, hipoxia, hipotermia extrema y meningitis, entre otras. La enzima LDH se ha utilizado a menudo en animales de laboratorio, junto con los niveles de troponina, para detectar daño miocárdico (Evans, 2009; Herman et al., 2006). Sin embargo, la estabilidad de la LDH es muy susceptible a la congelación y los valores se ven afectados por las condiciones de almacenamiento (Mitruka y Rawnsley, 1981; Tietz, 1976).


Read More: https://www.chopo.com.mx/deshidrogenasa-lactica-en-suero